Tinción de gram de muestra de cavidad oral

La tinción de gram de una muestra extraída de la cavidad oral fue una práctica que realicé mientras cursaba la asignatura de microbiología. Durante el segundo curso del CFGS de Laboratorio de Diagnóstico Clínico.

Título

Tinción de gram de una muestra extraída de la cavidad oral.

Objetivo

Visualizar microorganismos presentes en una muestra procedente de la cavidad oral de un paciente.

Fundamento

Para realizar una tinción de gram se utilizan dos colorantes. Uno de carácter primario (cristal violeta,) y otro de contraste (safranina). También se utiliza un mordiente para la safranina (lugol) y un decolorante (alcohol/acetona).

Esta tinción pone de manifiesto la afinidad tintorial de la pared. Ésta depende de su composición para que el microorganismo sea considerado grampositivo o gramnegativo. Los microorganismos grampositivos se diferencian de los gramnegativos en que tienen más cantidad de mureína, una pared celular monoestratificada y ácidos teitoicos. Los gramnegativos tienen menos cantidad de mureína, una pared celular biestratificada y carecen de ácidos teitoicos.

El resultado de la tinción, junto a la morfología bacteriana, sirven para clasificar las bacterias como:

  • Cocos grampositivos
  • Bacilos grampositivos
  • Cocos gramnegativos
  • Bacilos gramnegativos

También existen bacterias en forma de espiral, catalogadas dentro de las bacterias gramnegativas, y bacterias con forma de coma o vibrio que se incluyen dentro de los bacilos gramnegativos.

Muestras de la cavidad oral o bucal

Las muestras extraídas de la cavidad oral, o cavidad bucal, se obtienen porque puede haber presencia de microorganismos del aparato respiratorio. La tinción de gram sobre este tipo de muestra se emplea, fundamentalmente, para la búsqueda de la Angina de Vincent.

Material y reactivos

Técnica

  • Enjuagar con agua la cavidad oral del paciente.
  • Tomar una muestra, con un hisopo, de la cara interna de la mejilla.
  • Hacer una extensión sobre un portaobjetos.
  • Realizar una tinción de gram a la extensión (técnica y todo lo relacionado con ella si se hace click en el enlace).
  • Observar al microscopio óptico e identificar las bacterias presentes en la muestra.

Resultados

Se observaron cocos grampositivos apelotonados, pero no agrupados. También se observaron fusobacterias gramnegativas.

Observaciones

A la hora de obtener la muestra hay que tener especial cuidado de no impregnar el hisopo con la saliva del paciente. Para realizar la extensión sobre el portaobjetos, no fue necesario el uso de agua destilada.

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