Técnica de manejo del microscopio de campo brillante con objetivos secos

La práctica Técnica de manejo del microscopio de campo brillante con objetivos secos fue la primera práctica que realicé en un Laboratorio. Huelga decir que ese Laboratorio era el de la clase. Realicé la práctica en la clase de Hematología, pero bien podría encuadrarse en cualquier asignatura, asi que lo dejo en la categoría de Laboratorio de Diagnóstico Clínico sin más.

Técnica de manejo del Microscopio de campo brillante con objetivos secos

Título

Técnica de manejo del microscopio de campo brillante con objetivos secos

Objetivos

  • Aprender el manejo correcto del microscopio óptico
  • Familiarizarse con el uso de los tornillos macrométrico y micrométrico, además de los tornillos del carro
  • Aprender a enfocar objetivos secos
  • Aprender el mantenimiento del microscopio

Fundamentos

El microscopio óptico compuesto, usado en esta práctica en particular y en el laboratorio en general, consta de diferentes sistemas, y cada uno de ellos tiene a su vez diferentes partes.

  • Sistema óptico
    • Ocular:
    • Lentes situadas en la parte superior del microscopio, donde acercamos los ojos para observar. Capta y amplía la imagen recogida por los objetivos.

    • Objetivos:
    • Tubos que cuentan en su interior con un sistema de lentes de diferentes aumentos.

    • Condensador:
    • Sistema de lentes cuya función es concentrar la luz procedente del sistema de iluminación.

    • Diafragma:
    • Dispositivo que regula la cantidad de luz que entra en el condensador.

  • Sistema de Iluminación
    • Interruptor de encendido y apagado.
    • Lámpara
    • Espejo que dirige la luz hacia el condensador
    • Regulador de la intensidad lumínica
  • Sistema Mecánico
    • Soporte o Pie:
    • Sirve de base al microscopio y su función es dar estabilidad al aparato.

    • Platina:
    • Placa horizontal que sirve de soporte para la preparación. Contiene un orificio en el centro que permite el paso de la luz procedente del condensador hasta la preparación.

    • Revólver:
    • Elemento giratorio que contiene los objetivos y que permite disponer, al girar, del objetivo deseado.

    • Porta-oculares:
    • Es el extremo superior del tubo que soporta los oculares y los objetivos.

    • Tornillos macrométrico y micrométrico:
    • Permiten aproximar o alejar la platina para obtener el enfoque deseado de la preparación.

    • Carro:
    • Dispositivo que permite desplazar la muestra por la platina. Incorpora dos escalas tipo nonius, una longitudinal y otra transversal que permitan establecer la posición exacta de cualquier zona de la preparación.

Ajuste del Microscopio Óptico de Campo Brillante

A la hora de usar el microscopio es fundamental ajustarse el asiento para observar a través de los oculares de una forma cómoda y precisa.

La platina debe estar situada lo más abajo posible para colocar la muestra y elegir el objetivo, evitando que éste golpee en la preparación o en la propia platina.

Se enchufa el microscopio a la red eléctrica y nos aseguramos de que la intensidad lumínica es baja. El microscopio de campo brillante debe quedarse con el interruptor apagado y con la intensidad baja.

Se ajustan los oculares hasta que solo veamos un círculo y subimos la platina con el tornillo macrométrico. Esto debe hacerse con el debido cuidado de no golpear el objetivo con la preparación. Después, con el tornillo micrométrico, ajustamos el enfoque hasta que podamos observar la preparación de forma adecuada.

Con el diafragma modificamos la intensidad de luz hasta ver la muestra con la claridad deseada. Si la preparación es transparente tendremos que dejar el diafragma prácticamente cerrado, con poca intensidad luminosa.

Como el objetivo es seco no necesitaremos interponer ninguna sustancia que modifique el índice de refracción entre el objetivo y la preparación, como podría ser aceite de inmersión.

Mantenimiento del Microscopio Óptico de Campo Brillante

Finalmente se realizarán las operaciones de mantenimiento pertinente antes de guardar el microscopio óptico de campo brillante:

  • Limpiar las lentes con una dilución de alcohol-eter, especialmente si se ha utilizado aceite de inmersión, y con un paño que no deje partículas.
  • Bajar la platina y disminuir la intensidad lumínica antes de apagarlo.
  • Desenchufar el microscopio y enrollar el cable alrededor de los oculares.
  • Cubrir el Microscopio de campo brillante para que no coja polvo
  • Moverlo con delicadeza y depositarlo en lugar seguro con suavidad para evitar que se descalibren sus componentes, ya que se trata de un aparato de mucha precisión.

Material

  • Microscopio de campo brillante
  • Portaobjetos
  • Papel milimetrado
  • Lápices de colores
  • Tijeras
  • Cinta adhesiva o celo

Técnica

  1. Pintamos con diferentes colores un recuadro de 3×3 mm en el papel milimetrado, pintando con diferentes tonalidades los recuadros de las esquinas y el cuadrado central. De 1 mm2 cada uno.
  2. Recortamos un recuadro un poco más grande que englobe al que menos pintado.
  3. Disponemos dicho recuadro en un portaobjetos y le aplicamos celo para que quede bien fijado y no se mueva.
  4. Con ayuda del carro y de sus tornillos colocamos y centramos la preparación en la platina.
  5. Enfocamos la preparación con el objetivo de 4X para observar y anotar, después, las medidas y la disposición de los colores.
  6. Enfocamos la preparación con el objetivo de 10X y con la ayuda del carro anotamos las coordenadas en las que se encuentra cada color.
  7. Enfocamos con el objetivo de 40X y anotamos la medida de cada color.
  8. Cambiamos de nuevo al objetivo de 10X.
  9. Localizamos, utilizando dicho objetivo, los colores, utilizando las coordenadas anotadas anteriormente.

Resultados

Microscopio de campo brillanteMicroscopio óptico de campo brillante

Microscopio de campo brillanteFuente de luz

Microscopio de campo brillanteRevólver de objetivos

microscopiocampobrillante9Tornillos macrométrico y micrométrico

Microscopio de campo brillanteEscala tipo nonius

Microscopio de campo brillanteOculares (10X de resolución)

Microscopio óptico de campo brillanteTornillos del carro

Microscopio de campo brillantePreparación

Microscopio de campo brillantePreparación vista con el objetivo de 4X (Resolución de 40X)

Microscopio óptico de campo brillantePreparación vista con el objetivo de 10X (Resolución de 100X)

Microscopio óptico de campo brillantePreparación vista con el objetivo de 10X (Resolución de 100X)

Como podemos apreciar en las imágenes, debido al juego de lentes del microscopio óptico de campo brillante, la imagen obtenida está invertida y girada.

Con el objetivo de 4X observamos un campo de unos 4 mm de diámetro. Se pueden observar tres cuadros enteros y dos porciones laterales de otros cuadrados que sumados darían un cuadrado entero -aproximadamente-.

Con el objetivo de 10X el campo observado tiene un diámetro de unos 2 milímetros.

microscopio óptico de campo brillantePreparación vista con el objetivo de 40X (Resolución de 400X). Ampliada ópticamente con el zoom de la cámara.

microscopiocampobrillante5Preparación vista con el objetivo de 40X (Resolución de 400X). Ampliada ópticamente con el zoom de la cámara.

Con el objetivo de 40X el diámetro visualizado es menor, siendo éste de un tamaño inferior a 1 mm, ya que no logramos ver un cuadrado completo.

Finalmente, utilizando la escala nonius, anotamos las coordenadas de cada color para poder visualizarlo sin tener que recurrir a una nueva búsqueda por la preparación.

Usando el objetivo de 10X para ello, obtenemos las siguientes coordenadas (Eje X, Eje Y):

– Azul (142’6, 11’2)
– Amarillo (140’6, 11’2)
– Negro (141’6, 10’2)
– Verde (140’6, 9’2)
– Morado (142’6, 9’2)

Observaciones

  • Los tornillos de enfoque (macrométrico y micrométrico) giran en el sentido horario cuando alejamos la platina del objetivo.
  • El campo de la muestra disminuye a medida que aumenta el objetivo.
  • Al ser una muestra opaca debemos abrir el diafragma completamente, para dejar pasar el máximo de luz. Al igual que poner la máxima intensidad posible.
  • El microscopio tiene una buena parafocalidad y paracentricidad.

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