Siembra de sólido a solido (placa a tubo) por lengüeta y picadura

La práctica Siembra de sólido a sólido (placa a tubo) por lengüeta y picadura la realicé en la asignatura de Microbiología. Durante el segundo curso de mis estudios del CFGS de Laboratorio de Diagnóstico Clínico.

En realidad esta práctica la realicé en dos partes. Una siembra por lengüeta por un lado, y una siembra por lengüeta y picadura por otro. Pero siempre de sólido a sólido y de placa a tubo. He preferido unificarlas porque carece de sentido hacer dos prácticas casi idénticas porque la segunda engloba a la primera.

Título

Siembra de sólido a solido (placa a tubo) por lengüeta y picadura.

Objetivo

Aprender a realizar una siembra en tubo, de sólido a sólido, procedente de una placa previamente sembrada. Las técnicas utilizadas para ello serán por lengüeta y por picadura.

Fundamento

La finalidad de estas técnicas es la de resembrar un microorganismo en un tubo. Dicho microorganismo debe proceder de una placa de petri, con un medio de cultivo, previamente sembrada. También puede ser útil para aislar un microorganismo concreto y sembrarlo en un medio específico que favorezca su identificación por métodos bioquímicos.

Siembra de sólido a sólido (placa a tubo) por lengüeta y picadura

Se toma, con un asa de siembra de platino, una muestra de un microorganismo procedente de un cultivo sólido (placa). Se siembra en otro medio sólido que difiere del anterior (tubo). La siembra en este nuevo medio se realiza por lengüeta o slamp, zigzagueando por la superficie inclinada del medio sólido que se encuentra en el tubo.

La técnica de picadura es aún más sencilla, pero requiere del uso de un hilo de siembra de platino. La muestra del microorganismo, procedente de la placa, se transfiere al tubo atravesando su medio de cultivo hasta alcanzar el fondo del tubo.

Material y reactivos

  • Microorganismo problema
  • Asa de siembra de platino
  • Hilo de siembra de platino
  • Mechero Bunsen
  • Papel de filtro
  • Tubo con medio de cultivo sólido (TSI)
  • Tapón metálico
  • Gradilla
  • Estufa

Técnica

  1. Coger un inóculo de un microorganismo con un hilo de siembra previamente esterilizado en el mechero bunsen.
  2. Realizar la siembra por picadura introduciendo el hilo de siembra en el medio hasta el fondo del tubo.
  3. Coger un inóculo con un asa de siembra estéril.
  4. Realizar una siembra por lengüeta en el mismo medio, zigzagueando con el asa desde el fondo del tubo hacia adelante.
  5. Tapar el tubo con el tapón metálico e incubar en la estufa a 37ºC.
  6. Una vez incubado se observa y se valora el resultado al día siguiente.

Resultados e interpretación

simbra `por lengüetaSiembra por lengüeta en tubo

PicaduraSiembra por picadura en tubo

TSIMedio TSI de otra práctica diferente sembrado por lengüeta y picadura

El resultado fue un cambio de color en el medio de cultivo del tubo. Éste pasó de amarillo a rojizo, debido a que el medio de cultivo posee algún nutriente necesario para el metabolismo del microorganismo.

La imagen del medio de cultivo (TSI) fragmentado y con crecimiento de un microorganismo, corresponde a otra práctica.

Observaciones

Al tratarse de una técnica compuesta de doble siembra, hay que extremar las precauciones para evitar que el tubo se contamine. Además de hacer la siembra por partida doble, se utilizan dos herramientas diferentes que se deben esterilizar convenientemente.

Cuando se utilice el asa de siembra habrá que esterilizarlo previamente a la preparación del inóculo. Lo mismo ocurre con el hilo de siembra. En ambos casos hay que tener una precaución añadida, y es dejar que se enfríen después de haber pasado por la llama del mechero bunsen. Si la temperatura del asa, o del hilo, es muy alta, eliminaremos los microorganismos del inóculo y no crecerá nada.

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