Recuento de hematíes en cámara de Neubauer

El Recuento de hematíes en cámara de Neubauer es una práctica que realicé en la asignatura de hematología. Durante el segundo curso de mis estudios del CFGS de Laboratorio de Diagnóstico Clínico.

Título

Recuento de hematíes en cámara de Neubauer

Objetivos

  • Realizar un recuento de hematíes
  • Aprender a utilizar la cámara de Neubauer

Fundamento

El recuento de hematíes mediante cámara consiste en determinar el número de hematíes presentes en un volumen determinado de sangre diluída. La muestra de sangre se diluye lo suficiente para que los hematíes estén separados unos de otros y así poder contarlos. El recuento se realiza en una cámara de Neubauer o similar de dimensiones conocidas.

La profundidad de la cámara es de 0,1 mm. Los cuadrados de las esquinas miden 1 mm2 de superficie y están subdivididos en 16 cuadrados más pequeños de 0,25 mm de lado. El cuadrado del centro está dividido en 16 cuadrados de 0,2 mm de lado y éstos a su vez están subdivididos en 16 cuadrados de 0,05 mm de lado.

Recuento de hematíes en cámara de Neubauer

En el recuento de hematíes se emplean líquidos de dilución isotónicos para que éstos no se dañen. El diluyente más utilizado para este recuento es el líquido de Hayem, que contiene mercurio con la finalidad de destruir los leucocitos.

Los valores de referencia en el recuento de hematíes son de 4,5-6 Terahematíes/litro (Th/L) para hombres y 4-5,5 Th/L para mujeres. O lo que es lo mismo, 4,5-6 * 106 y 4-5,5 * 106 hematíes/mm3 respectivamente.

La disminución del número de hematíes se da en anemias, aunque éste no sea el criterio específico para su diagnóstico. El incremento de su número se da en poliglobulias.

Material

  • Pipeta de 2 ml
  • Micropipeta automática de 10 microlitros
  • Puntas de micropipeta
  • Guatis
  • Cubreobjetos
  • Cámara de Neubauer
  • Tubo de ensayo
  • Microscopio óptico

Reactivos

  • Sangre anticoagulada con EDTA
  • Líquido de Hayem

Técnica

  1. Con una pipeta echar en un tubo de ensayo 2 ml de líquido de Hayem.
  2. Con la micropipeta automática de 10 microlitros retirar dicho volumen del tubo de ensayo.
  3. Echar 10 microlitros de sangre en el tubo, haciendo un factor de dilución de 1/200.
  4. Homegeneizar bien la mezcla.
  5. Poner el cubreobjetos sobre la cámara de Neubauer.
  6. Cargar la cámara con la micropipeta automática.
  7. Dejar reposar la cámara durante 5 minutos.
  8. Observar al microscopio óptico, realizando un recuento de cinco de los cuadrados de 0,2 mm de lado del cuadrado central.

Resultado

Se leyeron 5 cuadrados al azar de los 16 que consta el cuadrado central. Es conveniente tener cuidado al contar los hematíes que están en contacto con las rayas que delimitan los cuadrados. Si un hematíe está en contacto con las rayas superior y derecha, entonces se cuenta. En cambio, si está en contacto con las rayas inferior e izquierda, no se cuenta.

Los conteos fueron los siguientes: 95, 95, 82, 83 y 79, haciendo una suma de 434 hematíes en esos cinco cuadrados. El cálculo consiste en una simple regla de 3, si hay 434 hematíes en 5*(0,1*0,2*0,2) mm3, en 1 mm3 habrá X hematíes. La resolución de esta regla de 3, una vez despejada la X, es de 21700 hematíes/mm3 diluídos.

Esa cifra hay que multiplicarla por la inversa del factor de dilución (1/200), es decir, 21700*200 = 4,34*106 hematíes/microlitro.

Recuento de hematíes en cámara de Neubauer
Cámara de Neubauer utilizada en la práctica.
Recuento de hematíes en cámara de Neubauer
Micropipetas automáticas utilizadas junto a la cámara de Neubauer.
Recuento de hematíes en cámara de Neubauer
Muestra sanguínea, líquido de Hayem y cámara de Neubauer.
Recuento de hematíes en cámara de Neubauer
Dilución de la muestra en el líquido de Hayem.
Recuento de hematíes en cámara de Neubauer
Cargando la cámara de Neubauer una vez colocado el cubreobjetos.
Recuento de hematíes en cámara de Neubauer
Recuento de hematíes en cámara de Neubauer (400X de resolución).
Recuento de hematíes en cámara de Neubauer
Recuento de hematíes en cámara de Neubauer (400X de resolución).

Interpretación de los resultados

La sangre pertenecía a un hombre, por lo que la cifra de hematíes es inferior a los valores de referencia. Por tanto, el paciente tiene eritropenia, ya que los valores de referencia son 4,5-6 Th/L.

Observaciones

Los valores obtenidos por otros compañeros daban valores normales. Ésto da pie a pensar que no homogeneicé la muestra debidamente y los hematíes no se distribuyeron correctamente en la cámara de Neubauer.

Los recuentos de células mediante cámara de recuento, o hemocitómetros, son técnicas con un elevado margen de error, especialmente en el recuento de hematíes donde puede llegar a ser del 20%. En determinadas circunstancias el error puede ser incluso mayor (vejez de la muestra, muestra de sangre con coágulos, material sucio, mala calibración de pipetas, etc.)

Deja un comentario

Uso de cookies

Este sitio web utiliza cookies para que usted tenga la mejor experiencia de usuario. Si continúa navegando está dando su consentimiento para la aceptación de las mencionadas cookies y la aceptación de nuestra política de cookies, pinche el enlace para mayor información.plugin cookies

ACEPTAR
Aviso de cookies