Realización de un cariotipo

La Realización de un cariotipo es una práctica que realicé en la asignatura de bioquímica clínica. Durante el segundo curso de mis estudios del CFGS de Laboratorio de Diagnóstico Clínico.

Esta práctica consta de dos técnicas por separado. Por una parte tenemos la técnica real y por otra la técnica que se realizó en clase. La diferencia entre una y otra es obvia, ya que por cuestiones económicas existen muchas técnicas que son imposibles de realizar en un laboratorio educativo.

Durante el ciclo formativo muchas técnicas se realizaron con reactivos caducados desde hace bastantes años. También era frecuente encontrar controles y/o calibradores vacíos porque el presupuesto no daba para su reposición.

Título

Realización de un cariotipo.

Objetivo

Realizar un cariotipo y representarlo mediante un Idiotipo.

Fundamento

El cariotipo es una prueba que se realiza para identificar anomalías cromosómicas como causa de malformaciones o de cambios genéticos asociados a una enfermedad.

Por medio de esta prueba se puede:

  • Contar la cantidad de cromosomas
  • Detectar cambios cromosómicos estructurales

El número normal de cromosomas humanos es de 46 XX para mujeres y 46 XY para hombres. Los diferentes tipos, según la posición del centrómero, son:

  • Metacéntricos: Tienen los dos brazos aproximadamente iguales en longitud con el centrómero en su parte media.
  • Submetacéntricos: Con un brazo largo y un brazo corto. El centrómero se sitúa cerca de uno de los extremos.
  • Acrocéntricos: Con un brazo corto muy pequeño y el centrómero se sitúa muy próximo a los extremos.
  • Telocéntrico: Sólo disponen de un brazo porque el centrómero se localiza en el extremo.

Cariotipo

Para estudiar el cariotipo hay que obtener una muestra, generalmente de sangre heparinizada. Estas células se cultivan en un medio con sustancias estimulantes de la división celular durante unos quince días, al cabo de los cuales se le añade colchicina, un agente que bloquea las divisiones celulares. En algunas de las células aparecen los cromosomas bien diferenciados.

Material y reactivos

  • Fotocopia del cariotipo para realizar el idiotipo
  • Tijeras
  • Papel
  • Pegamento
  • Bolígrafo

Técnica real

  1. Extraer una muestra.
  2. Cultivar dicha muestra con un medio RPMI al que se añadirán un buffer y una sustancia estimulante de la división celular (Fitohemaglutinina).
  3. Incubar a 37 ºC durante 48-72 horas.
  4. Tras la incubación se añadirá una sustancia paralizante de la mitosis (Colchicina).
  5. Realizar extensión de la muestra y teñir con Giemsa.
  6. Realizar el idiograma.

Técnica realizada en clase

  1. Recortar la representación de los cromosomas de la fotocopia.
  2. Emparejar los cromosomas y distribuirlos en función de su tamaño.
  3. Pegarlos y enumerarlos en una hoja de papel.

Resultado e interpretación

Realización de un cariotipo
Realización de un cariotipo.

Observaciones

No se emparejaron los cromosomas sexuales debido a que el cariotipo se realizó por tamaño. Si los cromosomas sexuales hubieran sido XX entonces sí se podrían haber emparejado ya que serían del mismo tamaño.

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