La Prueba del Indol es una práctica que realicé en la asignatura de microbiología clínica. Durante el segundo curso de mis estudios del CFGS de Laboratorio de Diagnóstico Clínico.
La prueba del Indol pertenece a las llamadas pruebas IMVIC, que están compuestas por:
- Indol
- Rojo de Metilo
- Vogues Proskauer
- Citrato
Son pruebas bioquímicas que se emplean, fundamentalmente, para la identificación de las Enterobacterias. Dependiendo de las condiciones, estas bacterias pueden realizar un metabolismo aerobio, anaerobio y distintas fermentaciones.
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Título
Pruebas IMVIC: Prueba del Indol.
Objetivo
Comprobar que el microorganismo problema posee la enzima triptofanasa.
Fundamento
Es una prueba del metabolismo protéico. El medio de cultivo que se utiliza es agua de peptona porque tiene triptófano. Si el microorganismo problema tiene triptofanasa la desdoblará dando lugar a diversos metabolitos (indol, escatol o indol acético) según la naturaleza del propio microorganismo.
Pruebas IMVIC: Prueba del Indol
Todos los metabolitos son compuestos indólicos que se ponen de manifiesto al añadir el reactivo de Kovacs al medio. De este modo, si dichos compuestos están presentes, aparecerá un anillo de color rojo en la superficie del tubo.
Material y reactivos
- Microorganismo problema procedente de un cultivo
- Medio de cultivo de agua de peptona en tubo
- Asa de siembra de platino
- Mechero bunsen
- Papel de filtro
- Pipeta pasteur
- Reactivo de Kovacs
- Estufa de cultivo
Técnica
- Sembrar el microorganismo problema en el medio de agua de peptona añadiendo dos o tres colonias/inóculos procedentes de un cultivo. Para ello utilizar un asa de siembra y la técnica de agitación.
- Incubar a 37ºC durante un periodo de tiempo comprendido entre 24 y 48 horas.
- Añadir cinco gotas de reactivo de Kovacs
- Agitar suavemente y dejar reposar
Resultado e interpretación
La prueba se considera positiva si aparece un anillo de color rojo en la superficie del medio de agua de peptona. Por contra, si no aparece y el medio permanece con la misma apariencia, el resultado será negativo.
