Prueba de la oxidasa

La Prueba de la oxidasa es una práctica que realicé en la asignatura de microbiología. Durante el segundo curso de mis estudios del CFGS de Laboratorio de Diagnóstico Clínico.

Título

Prueba de la oxidasa.

Objetivo

Comprobar si un microorganismo problema posee la enzima oxidasa.

Fundamento

La oxidasa es una denominación genérica de una enzima que recibe el nombre de citocromo oxidasa. Hasta ahora se pensaba que era la enzima que participaba en la transferencia de electrones en la cadena respitatoria hacia el oxígeno, y que era única.

Se puede definir como una enzima que cataliza electrones cuando son transferidos desde un sustrato al oxígeno. Se ha detectado en microorganismos aerobios y anaerobios facultativos y no se detecta en anaerobios estrictos.

Prueba de la oxidasa

Se pone en contacto un microorganismo problema con un sustrato que cambia de color cuando se oxida. Si el microorganismo posee la enzima oxidará el sustrato y se podrá detectar.

Material y reactivos

  • Papel de filtro
  • Tijeras
  • Portaobjetos
  • Pipeta pasteur
  • P-fenil diamina
  • Microorganismo problema procedente de un cultivo
  • Asa de siembra de platino

Técnica

  1. Recortar un trozo de papel de filtro.
  2. Colocar el trozo de papel de filtro encima de un portaobjetos.
  3. Impregnar el papel con P-fenil diamina haciendo uso de una pipeta pasteur.
  4. Realizar la impronta de un microorganismo problema usando un asa de siembra de platino.
  5. Visualizar y anotar el resultado.

Resultado e interpretación

El microorganismo será considerado oxidasa positivo si la impronta adquiere color. Este color es tirando a rojizo.

Prueba de la oxidasa
En nuestro caso el resultado fue completamente negativo. La impronta no adquirió ningún color.

Observaciones

Hubo variedad de resultados porque se utilizaron diferentes microorganismos problema. Fue útil para comparar diversas positividades frente a un negativo claro.

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