Prueba de la DNasa

La Prueba de la DNasa es una práctica que realicé en la asignatura de microbiología. Durante el segundo curso de mis estudios del CFGS de Laboratorio de Diagnóstico Clínico.

Esta práctica es una concatenación de otra práctica anterior, en la que elaboramos un medio de cultivo. Éste estaba compuesto de agar DNasa, que se utilizó en esta práctica.

Título

Prueba de la DNasa.

Objetivo

Comprobar si un microorganismo problema tiene actividad desoxirribonucleasa.

Fundamento

Es una prueba enzimática que se emplea para diferenciar distintas especies de Staphylococcus Aureus, que normalmente produce desoxirribonucleasas, de otros Staphylococcus.

Prueba de la DNasa

Al poner en contacto un microorganismo con un medio que lleva ADN, si es DNasa positivo despolimerizará el ADN cambiando la estructura del medio. En cambio, si es DNasa negativo, no lo hará.

Si el método no se observa a simple vista, se debe revelar con HCl 1N. Si el microorganismo produce desoxirribonucleasa, se apreciará un cambio en el agar.

Material y reactivos

  • Microorganismo problema
  • HCl 1N
  • Pipeta pasteur
  • Placa de petri con agar DNasa
  • Asa de siembra de platino
  • Mechero bunsen
  • Papel de filtro
  • Estufa de cultivo

Técnica

  1. Sembrar el microorganismo problema en el centro de la placa de petri, sobre el medio de cultivo, en forma de rejilla apretada.
  2. Incubar a 35-37ºC de 18 a 20 horas.
  3. Sacar la placa de la estufa y añadir unas gotas de HCL 1N sobre la zona que está sembrada.
  4. Dejar reposar de 3 a 5 minutos.
  5. Visualizar y anotar el resultado.

Resultado e interpretación

Prueba DNasaRepresentación gráfica de la siembra en rejilla

Si sale un halo claro alrededor del crecimiento bacteriano el resultado es positivo. Si no se observa ninguna zona clara es negativo.

En el caso de nuestro grupo de prácticas, el resultado fue completamente negativo. El estafilococo que teníamos en clase no era del género Aureus por razones evidentes (pese a que se venden modificados genéticamente para no ser patógenos). Por tanto no tenía actividad desoxirribonucleasa.

Observaciones

Como en todas las pruebas enzimáticas, si el cultivo es joven, el resultado se visualiza mejor.

Deja un comentario

Uso de cookies

Este sitio web utiliza cookies para que usted tenga la mejor experiencia de usuario. Si continúa navegando está dando su consentimiento para la aceptación de las mencionadas cookies y la aceptación de nuestra política de cookies, pinche el enlace para mayor información.plugin cookies

ACEPTAR
Aviso de cookies