Observación al microscopio de un sedimento urinario con objetivo seco en preparación en fresco

La práctica Observación al microscopio de un sedimento urinario con objetivo seco en preparación en fresco fue la segunda práctica que realicé en la asignatura de Hematología. Aunque sea más bien una temática de Bioquímica, en Hematología aprovecharon la sencillez de esta práctica para seguir instruyendo a los alumnos en el manejo del Microscopio y en el uso de diferentes preparaciones.

Por este motivo no encasillo la práctica más que en Laboratorio de Diagnóstico Clínico en general. De hecho, al año siguiente, en el segundo curso, realicé una práctica sobre sedimento urinario bastante más amplia y específica que ésta. Cuando suba dicha práctica si que la enmarcaré en la categoría de Bioquímica.

Observación al microscopio de un sedimento urinario con objetivo seco en preparación en fresco

Título

Observación al microscopio de un sedimento urinario con objetivo seco en preparación en fresco

Objetivos

  • Aprender el manejo correcto del microscopio a la hora de observar estructuras incoloras.
  • Aprender a centrifugar muestras y a obtener el sedimento resultante.
  • Aprender a reconocer artefactos.

Fundamentos

Un microscopio óptico es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeños para ser observados a simple vista. Para ésto se utiliza un juego de lentes complejamente dispuestas junto con otras piezas que conforman el microscopio. (Ver fundamento de la práctica “Técnica de manejo del microscopio de campo brillante con objetivos secos”).

Para realizar una observación correcta en este tipo de muestras hay que buscar contraste. Para ello, la intensidad de luz debe estar reducida y el diafragma prácticamente cerrado.

En microscopios cuyo condensador sea móvil, se puede mover hacia abajo para reducir la cantidad de luz concentrada en el objetivo.

En una muestra con sedimento urinario se pueden encontrar hematíes, leucocitos, uratos amorfos, células renales, bacterias, mucina, espermatozoides, células de descamación, cristales de oxalato cálcico y fosfatos triples. Entre algunas otras estructuras que veremos más detalladamente en otra práctica más específica.

También se pueden observar artefactos procedentes de la propia muestra de orina como fibras o procedentes de la preparación de la muestra como burbujas de aire formadas con la colocación del cubreobjetos. También podemos encontrar polvo y suciedad procedente del propio cubreobjetos o del portaobjetos.

Material

  • Frasco de recogida de orina
  • Gradilla
  • Pipeta Pasteur de plástico
  • Tubo de centrífuga de plástico
  • Parafilm
  • Portaobjetos
  • Cubreobjetos
  • Microscopio óptico
  • Centrifugadora
  • Papel de filtro

Técnica

  1. Llenar con orina el frasco destinado a tal fin.
  2. Pipetear 10ml de orina del frasco e introducirlos en un tubo de centrífuga.
  3. Introducir el tubo de centrífuga poniendo especial cuidado en el hecho de llenar todos los agujeros con las muestras. En caso de no haber suficientes tubos de centrífuga se meterán en la centrifugadora en números pares y poniendo especial cuidado de colocarlos de forma opuesta para el correcto funcionamiento del aparato y su mantenimiento.
  4. Centrifugar durante 15 minutos a 1500rpm. Importante haber precintado, previamente, el tubo con parafilm. De este modo evitaremos que la orina salga del tubo mientras la centrífuga está en funcionamiento.
  5. Decantar el sobrenadante.
  6. Resuspender el sedimento utilizando una pipeta pasteur.
  7. Echar una gota pequeña de sedimento en el portaobjetos
  8. Montar un cubreobjetos encima de la muestra del portaobjetos. Para ello colocaremos el cubre en un ángulo de 30º, descendiendo después lo más lentamente posible sobre la muestra para evitar artefactos.
  9. Observar con los objetivos secos (4X, 10X y 40X. Especialmente los dos últimos).
  10. Limpiar y desechar correctamente el material.

Resultados

Observación al microscopioMuestra de orina en una gradilla

Observación al microscopioCentrífuga

Observación al microscopioCentrífuga funcionando

Observación al microscopioSedimento

Observación al microscopioSedimento

Observación al microscopioArtefacto

Observación al microscopioArtefacto rodeado de cristales, probablemente uratos amorfos (Objetivo 10X, Resolución 100X)

Observación al microscopioCristales (uratos amorfos) y célula de descamación (Objetivo 40X, Resolución 400X)

Observación al microscopioCristal de Oxalato Cálcico (Objetivo 40X, Resolución 400X)

Observación al microscopioEspermatozoide (click en la imagen para ampliar, objetivo 40X, Resolución 400X)

Observación al microscopioMúltiples células de descamación (click en la imagen para ampliar, objetivo 40X, Resolución 400X)

Observaciones

Las fotos proceden de dos muestras diferentes. Oxalatos, aglutinaciones de células de descamación y espermatozoides por un lado, y posibles uratos amorfos por otro.

La muestra que trabajó mi grupo procedía de una chica en fase de mantenimiento de la dieta Duncan. Posible motivo de la presencia de múltiples cristales en la muestra.

Dichos cristales probablemente fuesen uratos amorfos, característicos de orinas ácidas, las cuales son más frecuentes que las orinas básicas. En cualquier caso, y para salir de dudas, habría que realizar una prueba de PH a la orina de la que procede la muestra.

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