Elaboración de un medio de cultivo

La Elaboración de un medio de cultivo fue una práctica que realicé en la asignatura de microbiología. Durante el segundo curso de mis estudios del CFGS de Laboratorio de Diagnóstico Clínico.

Durante el curso, no fue el único medio de cultivo que realizamos en el laboratorio. Pero los demás no contaban como prácticas y es una lástima no haberlos documentado en su momento.

Título

Elaboración de un medio de cultivo.

Objetivo

Preparar un medio de cultivo compuesto por agar DNasa.

Fundamento

El agar DNasa es un medio de cultivo que se utiliza para detectar la actividad enzimática de la desoxirribonucleasa en un microorganismo problema. Este medio resulta ideal para la discriminación entre el Staphylococcus Aureus y el Staphylococcus Epidermidis.

Esta discriminación se lleva a cabo sembrando el microorganismo problema y comprobando la actividad DNasa tras poner en contacto el medio, junto con el microorganismo previamente incubado, con HCl.

Elaboración de un medio de cultivo de agar DNasa

En la actualidad se compran los medios ya elaborados en sus respectivas placas. Los fabricantes suelen ofertar mucha variedad, tanto en medios como en cantidades, lo cual facilita mucho la vida al laboratorio siempre que haya presupuesto.

Saber elaborar nuestros propios medios nos garantiza poder continuar con el trabajo del laboratorio ante una rotura de stock del fabricante o una falta puntual de presupuesto. Pero para ello necesitamos tener los medios adecuados, lo cual también supone un desembolso económico.

Material y reactivos

Técnica

  1. Tarar el vaso de precipitado en la balanza.
  2. Pesar 42 gramos de polvo de agar DNasa en el propio vaso de precipitado
  3. Disolver/suspender los 42 gramos en 1 litro de agua destilada previamente medido en una probeta o en un matraz. Dentro del propio vaso de precipitado.
  4. Calentar y agitar con la varilla de vidrio hasta ebullición y hervir durante un minuto.
  5. Esterilizar en el autoclave.
  6. Dejar enfriar a 45ºC y distribuir el medio en placas de petri estériles.

Resultados

Se prepararon 300 ml de agar DNasa, por lo que procedimos a disolver 12.6 gramos de polvo del medio de cultivo en 300 ml de agua destilada. Una vez realizados los cálculos y conocidos estos datos procedimos con la técnica.

elaboración de un medio de cultivoMedio de cultivo de agar DNasa

Elaboración de un medio de cultivoComposición del agar DNasa

Observaciones

Según las instrucciones del envase, si se desea, se pueden añadir 10 gramos de manitol y 0.025 gramos de azul de bromotimol por cada litro del medio.

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