Determinación cuantitativa de Creatinina

La Determinación cuantitativa de creatinina es una práctica que realicé en la asignatura de bioquímica clínica. Durante el segundo curso de mis estudios del CFGS de Laboratorio de Diagnóstico Clínico.

Título

Determinación cuantitativa de creatinina

Objetivo

Determinar la concentración de creatinina de una muestra problema.

Fundamento

La creatinina es el resultado de la degradación de la creatina, un componente de los músculos que puede ser transformado en ATP, fuente de energía para las células. La determinación cuantitativa de creatinina se utiliza en el diagnóstico y tratamiento de enfermedades renales, en la monitorización de la diálisis renal, y en el cálculo de diversos parámetros con la medida de otros constituyentes urinarios.

Determinación cuantitativa de creatinina

La creatinina de la muestra reacciona con el picrato alcalino formando un complejo coloreado. La velocidad de formación del complejo es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra problema. El intervalo de tiempo escogido para las lecturas permite eliminar gran parte de las interferencias conocidas del método.

Material y reactivos

  • Cubetas de espectrofotómetro
  • Fotocolorímetro
  • Micropipetas
  • Puntas de micropipetas
  • Papel de filtro
  • Suero sanguíneo problema
  • Kit creatinina de la casa comercial BSM
    • S: Patrón primario acuoso de creatinina 2 mg/dL
    • R1: Ácido pícrico 17,5 mmol/L
    • R2: Hidróxido sódico 0,29 mol/L
    • R: Un volumen de R1 con un volumen de R2

Técnica

  1. Reconstituir el reactivo R.
  2. Atemperar el reactivo R y el fotocolorímetro a 37±0,1ºC.
  3. Pipetear en una cubeta termostatizada a 37±0,1ºC.
    Determinación cuantitativa de creatinina
  4. Mezclar y poner en marcha el cronómetro.
  5. Leer la absorbancia (A1) al cabo de 30 segundos y a los 90 segundos (A2) de la adición de la muestra. Se lee a 500 nm de longitud de onda.
  6. Calcular: ∆A= A2 – A1.

Resultados e interpretación

A los 30 segundos:

  • Absorbancia Muestra: 0.239
  • Absorbancia Patrón: 0.018

A los 90 segundos:

  • Absorbancia Muestra 0.305
  • Absorbancia Patrón 0.054

Se realiza el cálculo de la concentración de creatinina haciendo uso de la fórmula incluída en el protocolo de la práctica:

Determinación cuantitativa de Creatinina

El resultado obtenido es de 3.66 mg/dl de creatinina.

Los valores de referencia para suero o plasma en mujeres son 0,7 – 1,4 mg/dL y para hombres de 0,6 – 1,1 mg/dL. Por tanto los valores están aumentados y pueden ser debidos a la caducidad del kit, a un mal procesamiento de la muestra, a un problema con los métodos de medición o al daño renal del paciente de quien procede la muestra.

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