Determinación cuantitativa de Alanina Transaminasa (ALT / GPT)

La Determinación cuantitativa de Alanina Transaminasa (ALT / GPT) es una práctica que realicé en la asignatura de bioquímica clínica. Durante el segundo curso de mis estudios del CFGS de Laboratorio de Diagnóstico Clínico.

Título

Determinación cuantitativa de Alanina Transaminasa (ALT / GPT)

Objetivo

Cuantificar la concentración de Alanina Transaminasa (ALT / GPT) en una muestra problema.

Fundamento

La Alanina Transaminasa (ALT / GPT) es una enzima intracelular que se encuentra principalmente en las células del hígado y el riñón.

Tiene mucha utilidad clínica en el diagnóstico de las enfermedades del hígado. Se observan niveles elevados en enfermedades hepáticas como la hepatitis, enfermedades de los músculos y traumatismos.

Cuando se emplea en conjunto con la AST, ayuda en el diagnóstico de infartos de miocardio, ya que el valor de la ALT se mantiene dentro de los límites normales mientras que aumentan los niveles de AST.

Determinación cuantitativa de Alanina Transaminasa (ALT / GPT)

La alanina aminotrasferasa (ALT), también llamada alanina transaminasa e inicialmente conocida como transaminasa glutámico pirúvica (GPT), cataliza la transferencia reversible de un grupo amino de la alanina al α-cetoglutarato con formación de glutamato y piruvato. El piruvato producido es reducido a lactato en presencia de lactato deshidrogenasa (LDH) y NADH.

La velocidad de disminución de la concentración de NADH en el medio, determinado fotométricamente, es proporcional a la concentración catalítica de ALT en la muestra problema.

Material y reactivos

  • Cubetas de espectrofotómetro
  • Fotocolorímetro
  • Micropipetas
  • Puntas de micropipetas
  • Papel de filtro
  • Suero sanguíneo problema
  • Agua desionizada
  • Kit ALT de la casa comercial Spinreact

Técnica

  1. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada o desionizada.
  2. Pipetear en una cubeta:
    Determinación cuantitativa de Alanina Transaminasa
  3. Mezclar e incubar 1 minuto a temperatura ambiente.
  4. Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el cronómetro y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos.
  5. Calcular el promedio del incremento de absorbancia por minuto (∆A/min).

Resultado

La lectura se realizó a 340 nm de longitud de onda. Las lecturas obtenidas fueron las siguientes:

  • Inicial: 0.023
  • Primer minuto: 0.130
  • Segundo minuto: 0.127
  • Tercer minuto: 0.127

El promedio de incremento de absorbancia es 0.03, valor que se multiplica por 1750 para obtener la concentración en U/L de ALT = 54,83 U/L.

Interpretación de los resultados

Los valores normales no superan los 32 U/L en mujeres y los 40 U/L en hombres, por tanto la ALT está elevada. Esto puede ser debido a un mal procesamiento de la muestra, a la caducidad del kit, a la falta de mantenimiento del material o a hepatopatías.

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