Determinación cuantitativa de Ácido Úrico

La Determinación cuantitativa de Ácido Úrico es una práctica que realicé en la asignatura de bioquímica clínica. Durante el segundo curso de mis estudios del CFGS de Laboratorio de Diagnóstico Clínico.

Título

Determinación cuantitativa de Ácido Úrico

Objetivo

Determinar la concentración de ácido úrico de una muestra problema.

Fundamento

El ácido úrico es oxidado por la uricasa a alantoína y peróxido de hidrógeno (H2O2) que en presencia de peroxidasa (POD), 4- aminoantipirina (4-AF) y 2-4 diclorofenolsulfonato (DCFS) forma una quinonaimina. La intensidad de quinonaimina formada es proporcional a la concentración de ácido úrico presente en la muestra ensayada.

Determinación cuantitativa de Ácido Úrico

El ácido úrico y sus sales son el producto final del metabolismo de las purinas. En una insuficiencia renal progresiva hay una retención en sangre de urea, creatinina y ácido úrico. La medida de la concentración del ácido úrico se utiliza en el diagnóstico y tratamiento de numerosas patologías renales y desordenes metabólicos, incluyéndose la gota, leucemia, psoriasis, etc. O en pacientes que reciben tratamiento con fármacos citotóxicos. El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

Material y reactivos

  • Cubetas de espectrofotómetro
  • Fotocolorímetro
  • Micropipetas
  • Puntas de micropipetas
  • Papel de filtro
  • Suero sanguíneo problema
  • Kit Ácido Úrico de la casa comercial BSM
    • S: Patrón primario acuoso de ácido úrico de 6 mg/dL.
    • R1 y R2: Reactivos de trabajo
    • R: Reconstitución de R2 con otro volumen de R1

Técnica

  1. Preparar tres cubetas de espectrofotómetro que se denominen Blanco, Patrón y Muestra.
  2. En el Blanco pipetear 1 ml de solución R y 25 μL de agua destilada.
  3. En el Patrón pipetear 1 ml de solución R y 25 μL de la sustancia patrón (S).
  4. Repetir el procedimiento con la Muestra, pipetear 1 ml de solución R y 25 μL del suero sanguíneo problema.
  5. Mezclar e incubar 5 minutos a 37ºC o 30 min.
  6. Leer la absorbancia (A) del Patrón y la Muestra, a 500 nm de longitud de onda, frente al Blanco de reactivo. El color es estable como mínimo 30 minutos, así que hay que efectuar las lecturas durante ese periodo de tiempo.

Resultado e interpretación

Los resultados fueron leídos a 500 nm de longitud de onda:

  • Absorbancia del Patrón: 0.005
  • Absorbancia de la Muestra: 0.029

Se realiza el cálculo de la concentración de ácido úrico haciendo uso de la fórmula incluída en el protocolo de la práctica. Fórmula idéntica a la expuesta en la práctica de la cuantificación de la glucosa y otras similares:

Cuantificación de la glucosa

El resultado obtenido es de 34,8 mg/dl de Ácido Úrico.

Los valores normales para mujeres son 2,5-6,8 mg/dL y para hombres 3,6-7,7 mg/dL, por tanto el paciente de quien procedía la muestra tendría hiperuricemia, indistintamente de su género.

Deja un comentario

Uso de cookies

Este sitio web utiliza cookies para que usted tenga la mejor experiencia de usuario. Si continúa navegando está dando su consentimiento para la aceptación de las mencionadas cookies y la aceptación de nuestra política de cookies, pinche el enlace para mayor información.plugin cookies

ACEPTAR
Aviso de cookies