Análisis de semen

El Análisis de semen es una práctica que realicé en la asignatura de bioquímica clínica. Durante el segundo curso de mis estudios del CFGS de Laboratorio de Diagnóstico Clínico.

Título

Análisis de semen

Objetivo

Aprender a analizar una muestra de semen y comprobar la calidad y la fertilidad del mismo.

Fundamento

Para realizar una buena determinación analítica del semen se deben efectuar dos tipos de examen: un examen macroscópico y un examen microscópico.

Análisis de semen

En el examen macroscópico se valoran una serie de parámetros visibles a simple vista y que nos pueden dar una idea sobre este fluido, como son el aspecto, el volumen, el pH, la coagulación, la licuefacción y la viscosidad.

En el examen microscópico se valoran una serie de parámetros que no son visibles a simple vista, haciendo uso de un microscopio óptico. Este examen da una información más detallada sobre la muestra. Los parámetros que se estudian son:

  • Motilidad: Determina la capacidad del espermatozoide de poder penetrar en el moco cervical y que pueda migrar hacia las trompas de falopio para fecundar el óvulo.
  • Vitalidad: Valora el porcentaje de células vivas y de células muertas presentes en la muestra.
  • Recuento espermático: Estudia el número de espermatozoides presentes por unidad de volumen en mililitros.
  • Fórmula espermática: Valora la morfología de los espermatozoides mediante un recuento diferencial de estos en extensiones teñidas.

Material y reactivos

  • Portaobjetos
  • Muestra de semen recogida en los 30-60 minutos anteriores al procesamiento de la muestra
  • Microscopio óptico
  • Tiras de pH
  • Papel de filtro
  • Pipeta pasteur
  • Agua destilada
  • Cámara de recuento de Neubauer modificada
  • Cronómetro
  • Colorantes: Giemsa, May-Grünwald, Azul de metileno, Nigrosina

Técnica

La técnica se divide en examen macroscópico y examen microscópico.

Examen macroscópico

  1. Aspecto: Se determina observando la muestra.
  2. Volumen: Su determinación se realiza colocando la muestra en un tubo graduado.
  3. pH: Se determina con una tira de papel tornasol una hora después de la recogida.
  4. Coagulación y licuefacción: Para determinarlo se coloca el tubo con la muestra en un baño termostatado a 37ºC y se controla el tiempo.
  5. Viscosidad: Su determinación se realiza tras la licuefacción y se hace mediante 2 métodos.
    • Introducir una varilla de vidrio en la muestra, impregnándola en ella y retirándola lentamente. Se mide la filancia de la muestra.
    • Se compara con el agua usando una pipeta y se absorben ambos líquidos. El agua caerá al colocarlo en vertical gota a gota sin necesidad de ejercer presión. Si la muestra cae a chorro al ponerla vertical, será menos viscosa que el agua, mientras que si hay que ejercer presión será superior.

Examen microscópico

  1. Motilidad: Colocar una gota de semen licuado entre el porta (calentado a 37ºC) y un cubre con vaselina en sus bordes. Observar varios campos a 40x. El resultado se expresara en % de movilidad (A y B) y de inmovilidad (D).
  2. Vitalidad/Test de William Pollack: Se coloca en un porta una gota de la muestra y una gota de eosina al 5% y homogeneizar 20 segundos. Después echar una gota de Nigrosina al 1% de forma opcional y homogeneizar. Cubrir con un porta y observar a 40x. El resultado se expresara en % de espermatozoides teñidos o con el índice de vitalidad (1/%).
  3. Recuento: Llenar una cámara de Neubauer con la muestra, que puede estar diluida (1/20) o sin diluir, y dejar reposar 2 minutos en cámara húmeda. Observar a 10x y contar 2 cuadrados para leucocitos. El resultado se expresará en número de espermatozoides/ml.
  4. Fórmula espermática: Realizar una extensión de la muestra, fijar con alcohol metílico cinco minutos y dejar secar al aire. Hacer una tinción de May-Grünwald-Giemsa: cubrir 4 minutos con May-Grünwald, echar agua por encima a pH = 7,2 durante 4 minutos y lavar con agua destilada. Después cubrir con Giemsa 12 minutos, lavar con agua destilada, dejar secar y observar a 100x con el objetivo de inmersión.

Resultado

Aspecto: Color blanco hueso.
Volumen: Aparentemente normal.
pH: 8,5.
Coagulación y licuefacción: La muestra estaba completamente licuada.
Viscosidad: Nula.
Estudio de la motilidad: El 100% de los espermatozoides pertenecían al grupo C y D.
Vitalidad: Se han contado 168 espermatozoides, de los cuales 127 estaban teñidos, es decir un 75,59% estaban muertos y 41 sin teñir, un 24,41% estaban vivos.
Recuento espermático: 8,6 x 106 espermatozoides/ml.
Fórmula espermática:
Análisis de semen

Análisis de semen
Análisis de semen microscópico. En el centro del campo de esta preparación se aprecia un espermatozoide de doble cola.
Análisis de semen
Análisis de semen microscópico. Espermatozoide fotografiado en un campo con una resolución de 1000X utilizando el objetivo de inmersión (100X).

Interpretación de los resultados

Los valores de referencia del análisis de semen son los siguientes:

Aspecto: Blanquecino.
Volumen: 2-5 ml.
pH: 7,2 – 8.
Coagulación y licuefacción: Totalmente licuada.
Viscosidad: Mayor que la del agua.
Estudio de la motilidad: Como mínimo, el 50% de los espermatozoides deben pertenecer a los grupos A y B.
Vitalidad: El 75% de los espermatozoides, como mínimo, deben estar vivos.
Recuento espermático: 20-250 x 106 espermatozoides/ml.
Fórmula espermática: Como mínimo, el 70% de los espermatozoides deben ser normales.

Comparando los resultados obtenidos con los considerados normales, podemos observar que en la mayoría de las determinaciones se han obtenido valores anómalos. Éstos han sido el pH (superior al normal), la viscosidad (inferior o igual a la del agua), la motilidad, la vitalidad y el recuento (inferiores a lo normal).

Por tanto podemos determinar que el semen es de muy baja calidad.

Observaciones

Por circunstancias personales me perdí buena parte de la práctica de análisis de semen. Por este motivo solo tengo imágenes del análisis microscópico, que fue el único que pude realizar.

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